Terapia Génica en Leucemia

v  Tipo de Terapia Génica: En vivo

v  Gen a tratar: BCR-ABL

v  Estrategias:

Ø  Vectores:  Víricos de la familia de los retrovirus

Ø  Introduciendo genes que codifiquen para péptidos portadores de dominios estructurales tipo dedo de zinc, capaces de reconocer de forma específica el punto de fusión y bloquear la transcripción

Ø  Introducen genes que codifiquen para ARN antisentido o para ribozimas que específicamente destruyen el ARN quimérico BCR-ABL

Ø  Inhibición de la actividad de la proteína oncogénica bien con anticuerpos monoclonales o bien con fármacos específicos que intervienen con la función de la proteína BCR-ABL, como el STI-571

  Resultados: Estos tipos de procedimientos no se han realizado en humanos.

Bibliografía:
http://digital.csic.es/bitstream/10261/6271/1/2003-Rev.%20Oncol.pdf
www.madrimasd.org

Formación de Transgénicos en la Leucemia

Con relación a la leucemia aguda promielocítica (M3) se pudo desarrollar un ratón transgénico que porta el gen humano fusionado PML-RARA que ha sido de gran utilidad para probar agentes terapéuticos como el transácido retinoico y el compuesto derivado del arsénico AS203. Uilizando el modelo murino transgénico, desarrollaron una vacuna de DNA al fusionar el gen PML-RARA humano a las secuencia del fragmento C de la toxina tetánica. El mayor efecto antileucémico, se obtuvo cuando se combinó la vacuna de DNA con la administración de ácido retinoico, pero los resultados fueron significativamente mejores con la vacuna de DNA que cuando se suministró solamente el ácido retinoico. Se demostró, además, que los ratones vacunados incrementaron la producción de anticuerpos con la duración del tratamiento, y que esta generación de anticuerpos, la respuesta de célula T y la liberación de citosinas se deben predominantemente a una respuesta de linfocitos T CD4+

Bibliografia:

http://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2004/gm042n.pdf 
teachingcases.hematology.org

Comparación de la antigenicidad de dos péptidos sintéticos y una proteína recombinante de la región de transmembrana (gp21) del HTLV-I

El virus de la leucemia de las células T humanas tipo I (HTLV-I) fue el primer retrovirus linfotrópico aislado de pacientes humanos, en 1980. El gen env codifica  la síntesis de la proteína precursora, gp62, que es degradada por una proteasa del virus en dos proteínas: gp21 y gp46, las cuales son expresadas en la superficie de la célula.  La proteína de la transmembrana gp21 resulta una de las proteínas más antigénicas  del virus del HTLV. Esta proteína, obtenida por la tecnología del ADN recombinante o por síntesis química, es ampliamente usada como antígeno en el diagnóstico del HTLV-I, se evaluó la antigenicidad de dos péptidos sintéticos gp21 (M-1) (377-400) y gp21 (13) (361-404) y una proteína recombinante de la región de la transmembrana (gp21) del HTLV-I

 

Bibliografía:

http://revista.cnic.edu.cu/revistaCB/sites/default/files/articulos/CB-2007-2-155-159.pdf 

www.monografias.com 

ADN recombinante

Un ejemplo en la utilización de ADN recombinante, se realiza en el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología en la ciudad de la habana donde, se realizado varios BCP, (para lograr la estabilidad al generar moléculas recombinantes, se debe elaborar los Bancos de Células Primarias(BCP) con lo cual también nos permite saber si las alteraciones generadas atentan contra la obtención del producto) para producir proteínas recombinantes como el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B, con el cuál se elabora la vacuna recombinante contra la hepatitis B .Los cambios que se observan en la viabilidad no se consideran importantes porque los valores se mantienen dentro del mismo orden logarítmico.

Bibliografía:

http://elfosscientiae.cigb.edu.cu/PDFs/BA/1994/11/1/p%2055%20-%2059%20.pdf
es.wikipedia.org

Estudio por el método de hibridación in situ con fluorescencia (FISH) en leucemia aguda promielocítica

La leucemia aguda promielocítica (LAP) presenta  una anormalidad cromosómica consistente en una translocación recíproca y balanceada entre los brazos largos de los cromosomas 15 y 17, está variación puede ser detectada mediante la hibridación in situ con fluorescencia (FISH), que se basa en la hibridación de un ADN problema con un trozo de ADN de secuencia conocida llamado sonda, marcado con un fluorocromo, que permite la detección y localización de una secuencia específica de ácidos nucleicos dentro del núcleo sin que éste pierda su estructura, empleando un reactivo comercial para detectar la fusión PML/RARa, evaluando además su sensibilidad y especificidad con respecto a la citogenética clásica como método de referencia, en muestras de células guardadas, sobrantes de estudios citogenéticos.

Bibliografía:

http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872002000700004

www.iqb.es

MAPA MOLECULAR DE LEUCEMIA

1.      Nivel genómico

Gen híbrido BCR-ABL permite la proliferación de leucocitos anómalos

Mutación de los genes:

NOTCH1, MYD88, XPO1, KLHL6, TEL-AML 1,  FLT3, NPM1, CEBPA, MLL RAS, BAALC

2.      Nivel Epigenómico

Ø  Edad

Ø  Estado funcional

Ø  Disminución de las células NK

Ø  Exposición al benceno

Ø  Radiaciones ionizantes

Ø  Mostaza nitrogenada

Ø  Metilación del ADN

Ø  Acetilación de las histonas

Ø  Expresión de microARN

3.      Nivel Transcripcional

El complejo transcripcional AML 1/CBFb es alterado por el gen híbrido TEL-AML 1

4.      Nivel Proteomico

Ø  Proteína de fusión (PML-RARa),  impidiendo la transcripción de genes y con ello el proceso de diferenciación celular.  

Ø  Proteína híbrida TEL-AML afecta la función normal del complejo transcripcional AML 1/CBFb

Ø  Proteínas generadas del gen de fusión BCR-ABL tienen actividad tirosinaquinasa aumentada, lo que favorece la proliferación neoplásica de las células hematopoyéticas a nivel de células primitivas pluripotenciales 

 

Bibliografía:

http://digital.csic.es/bitstream/10261/6271/1/2003-Rev.%20Oncol.pdf 
http://www.geneticamedica.com.uy/gm/servicios.html 
http://www.elsevier.es/sites/default/files/elsevier/pdf/2 

cancerinfo.tri-kobe.org